組織勻漿機是一種新型高速勻漿機的供試液制備儀器,它由大功率高速電機通過連軸器帶動裝在杯座上的攪拌刀高速旋轉(zhuǎn),將檢品快速、*地打碎、均質(zhì),與常規(guī)法制備的供試液相比,制備的供試液具有勻漿均勻、制備供試液快速等特點。不銹鋼勻漿杯可以整體消毒處理,方便安全??晒┽t(yī)學(xué)、制藥、化妝品、食品、微生物檢定作固體、液體、油劑的粉碎,均質(zhì)和乳化之用。
組織勻漿機供試品(固體、液體、油劑等)通過勻漿杯內(nèi)高速旋轉(zhuǎn)的刀片(攪拌刀、研磨刀、勻漿刀、絞肉刀)的研磨、攪拌,達到粉碎、均質(zhì)和乳化的效果。
對于勻漿的多種方式主要有:手工勻漿、機器勻漿、超聲勻漿以及反復(fù)凍融。
1.手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3勻漿介質(zhì)或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿管中進行勻漿,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6-8分鐘),充分研碎,使組織勻漿化。
2.機器勻漿:用組織搗碎機10000-15000r/min上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3-5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
3.超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用40安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3-5次。
4.反復(fù)凍融:培養(yǎng)或者分離的細胞可以用以上的方法勻漿,也可以反復(fù)凍溶3次左右(即讓細胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結(jié)冰,溶解,再結(jié)冰,再溶解,反復(fù)3次左右),但有部分酶活力會受影響。
取少量組織勻漿做涂片(直接涂片、染色均可),顯微鏡下觀察細胞是否磨破,若沒有破則可以延長勻漿時間或增加凍融次數(shù)。